Шинэ коронавирус (SARS-Cov-2) нуклейн хүчил илрүүлэх хэрэгсэл
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluхүдэрscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】Шинэ коронавирус (SARS-Cov-2) нуклейн хүчил илрүүлэх хэрэгсэл (Флюресцент RT-ПГУ-ын шинжилгээний арга)
【Packaging specifications 】25 тест/иж бүрдэл
【Intended usнас】
Энэхүү иж бүрдэл нь хамар залгиурын арчдас, ам залгиурын (хоолойн) арчдас, урд талын хамрын арчдас, хамрын хөндийн арчдас, хамрын угаалга, хамрын соруул зэрэгт шинэ коронавирусын халдвараас нуклейн хүчлийг чанарын хувьд илрүүлэхэд ашигладаг. Шинэ коронавирусын ORF1ab ба N генийг илрүүлэх нь шинэ коронавирусын халдварын туслах оношлогоо, эпидемиологийн хяналтад ашиглаж болно.
【Principles of the pгүйлтdure 】
Энэхүү иж бүрдэл нь шинэ төрлийн коронавирус (SARS-Cov-2) ORF1ab ба N генийн дараалалд зориулагдсан TaqMan датчик болон тусгай праймеруудад зориулагдсан. ПГУ-ын урвалын уусмал нь зорилтот объектыг тодорхой илрүүлэхэд зориулагдсан 3 багц тусгай праймер ба флюресцент датчикийг агуулдаг бөгөөд нэмэлт тусгай праймер болон флюресцент датчикийг эндоген ахуйн генийг илрүүлэх иж бүрдэлийн дотоод стандарт удирдлага болгон ашигладаг.
Туршилтын зарчим нь тодорхой флюресцент мэдрэгчийг ПГУ-ын урвал дахь Taq ферментийн экзонуклеазын идэвхжилд шингээж, задалдаг бөгөөд ингэснээр сурвалжлагч флюресцент бүлэг болон унтраасан флюресцент бүлгийг салгаж, флюресцент хяналтын систем нь флюресцент хүлээн авах боломжтой болно. дохио, дараа нь ПГУ-ын олшруулалтын баяжуулалтын нөлөөгөөр датчикийн флюресценцийн дохио нь тогтоосон босго утга-Ct утгад (Циклийн босго) хүрдэг. Зорилтот ампликон байхгүй тохиолдолд датчикийн сурвалжлагч бүлэг нь бөхөөх бүлэгт ойрхон байна. Энэ үед флюресценцийн резонансын энергийг шилжүүлэх ба сурвалжлагч бүлгийн флюресценцийг унтраах бүлэг унтраадаг тул флюресцент ПГУ-ын багажаар флюресцент дохиог илрүүлэх боломжгүй болно.
Туршилтын явцад урвалжийн хэрэглээг хянахын тулд иж бүрдэл нь эерэг ба сөрөг хяналтаар тоноглогдсон: эерэг хяналт нь зорилтот цэгийн рекомбинант плазмид, сөрөг хяналт нь хүрээлэн буй орчны бохирдлыг хянахад ашигладаг нэрмэл ус юм. Туршилт хийхдээ эерэг ба сөрөг хяналтыг нэгэн зэрэг тохируулахыг зөвлөж байна.
【Main comпоненts 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Бүрэлдэхүүнentts | |
| Намe | Specтогтоох | Тоо хэмжээity | Тоо хэмжээity | |
| Эерэг хяналт | 180 мкл / хуруу шилэнд | 1 | 1 | Хиймэл аргаар хийсэн плазмидууд, нэрмэл ус |
| Сөрөг хяналт | 180 мкл / хуруу шилэнд | 1 | 1 | Нэрмэл ус |
| SARS-Cov-2 холимог | 358.5 мкл / хуруу шилэнд | 1 | / | Тусгай хос праймер, тусгай илрүүлэгч флюресцент датчик, dNTPs, MgCl2, KCl, Tris-Hcl, нэрмэл ус гэх мэт |
| Ферментийн холимог | 16.5 мкл / хуруу шилэнд | 1 | / | Так фермент, урвуу транскриптаза, UNG фермент гэх мэт. |
| SARS-Cov-2 Холимог (Лиофильжүүлсэн) | 25 сорил / хуруу шил | / | 1 | Тусгай хос праймер, тусгай илрүүлэгч флюресцент датчик, dNTPs, Taq фермент, урвуу транскриптаза, нэрмэл ус гэх мэт. |
| 2х буфер | 375 мкл / хуруу шилэнд | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, нэрмэл ус гэх мэт. |
Анхаарна уу:(1) Төрөл бүрийн багцын бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг хольж, сольж болохгүй.
(2) Өөрийнхөө урвалжийг бэлтгэ: Нуклейн хүчлийн хандлах хэрэгсэл.
【Storage conditions болон expiration date 】
For BST-SARS-25:-20±5℃ хэмд удаан хугацаагаар тээвэрлэж хадгална.
For BST-SARS-DR-25:Өрөөний температурт тээвэрлэх. -20±5℃ хэмд удаан хугацаагаар хадгална.
Дахин давтагдах хөлдөөх, гэсгээх циклээс зайлсхий. Хүчинтэй байх хугацааг урьдчилсан байдлаар 12 сараар тогтоосон.
Үйлдвэрлэсэн болон ашигласан огноог шошгон дээрээс харна уу.
Эхний нээлхийн дараа урвалжийг хөлдөөх-гэсэх цикл давтагдахаас зайлсхийхийн тулд 1 сараас илүүгүй хугацаагаар эсвэл урвалж дуусах хугацаа дуустал хадгалах боломжтой. -Гэсгээх цикл 6 дахин ихгүй байх ёстой.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1.Хэрэглэх дээжийн төрөл: Олборлосон нуклейн хүчлийн уусмал.
2. Дээж хадгалах, тээвэрлэх: -20±5℃ хэмд 6 сарын турш хадгална. Дээжийг 6-аас илүүгүй удаа хөлдөөж, гэсгээнэ.
【Testing method】
1.Nucleic acid extraction
Вирусын нуклейн хүчлийг гаргаж авахын тулд тохирох нуклейн хүчил олборлох иж бүрдлийг сонгоод холбогдох зааврыг дагана уу. Yixin Bio-Tech (Гуанжоу) ХХК-ийн үйлдвэрлэсэн нуклейн хүчлийг гаргаж авах, цэвэршүүлэх иж бүрдэл эсвэл түүнтэй адилтгах нуклейн хүчил цэвэршүүлэх иж бүрдлийг ашиглахыг зөвлөж байна.
2. Reaction reagent prepараtion
2.1 For BST-SARS-25:
(1) SARS-Cov-2 холимог ба ферментийн хольцыг зайлуулж, тасалгааны температурт Vortex төхөөрөмжөөр сайтар хайлуулж, дараа нь богино хугацаанд центрифуг хийнэ.
(2) 358.5uL SARS-Cov-2 холимогт 16.5уЛ ферментийн холимог нэмээд холимог урвалын уусмалыг олж авахын тулд сайтар холино.
(3) Цэвэр 0.2 мл ПГУ-ын наймалж хоолой бэлтгэж, нэг нүхэнд дээрх холимог урвалын 15 uL уусмалаар тэмдэглэнэ.
(4) 15 мкл цэвэршүүлсэн нуклейн хүчлийн уусмал, эерэг ба сөрөг хяналтыг нэмж, наймалж хоолойн тагийг сайтар таглана.
(5) Урвуу тийш нь эргүүлж сайтар хольж, шингэнийг хоолойн ёроолд төвлөрүүлэхийн тулд хурдан центрифуг хийнэ.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
( 1) SARS-Cov-2 холимогт 375ул 2х буфер нэмнэ((Лиофилжүүлсэн) урвалын холимгийг бэлтгэнэ. Соруугаар сайтар хольж, дараа нь богино хугацаанд центрифуг хийнэ. （Урвалын хольц бэлтгэсний дараа -20 хэмд хадгалахыг зөвлөж байна. урт хугацааны хадгалалт.)
(2) Цэвэр 0.2 мл ПГУ-ын наймалж хоолой бэлтгэж, нэг нүхэнд 15 мкл урвалын хольцоор тэмдэглэнэ.
(3) 15 мкл цэвэршүүлсэн нуклейн хүчлийн уусмал, эерэг ба сөрөг хяналтыг нэмээд наймалж хоолойн тагийг сайтар таглана.
(4) Урвуу тийш нь эргүүлж сайтар хольж, шингэнийг хоолойн ёроолд төвлөрүүлэхийн тулд хурдан центрифуг хийнэ.
3. ПГУ amplification （Ашиглалтын тохиргоог багажийн гарын авлагаас үзнэ үү.）
3. 1 ПГУ-ын 8-хоолойг флюресцент ПГУ-ын багажны дээжийн камерт хийж, ачаалах дарааллын дагуу шалгах сорьц, эерэг ба сөрөг хяналтыг тохируулна.
3.2 Флюресценц илрүүлэх суваг:
(1) ORF1ab ген нь FAM-ийн илрүүлэх сувгийг сонгодог (сурвалжлагч: FAM, Quencher: Байхгүй).
(2) N ген нь VIC илрүүлэх сувгийг сонгодог (сурвалжлагч: VIC, Quencher: Байхгүй).
(3) Дотоод стандарт ген нь CY5 илрүүлэх сувгийг сонгодог (Сурвалжлагч: CY5, Quencher: Байхгүй).
(4) Идэвхгүй лавлагааг ROX гэж тохируулсан.
3.3 ПГУ-ын програмын параметрийн тохиргоо:
| Алхам | Температур (℃) | Цаг хугацаа | Циклийн тоо | |
| 1 | Урвуу транскрипцийн урвал | 50 | 15 мин | 1 |
| 2 | Так ферментийг идэвхжүүлэх | 95 | 2.5 мин | 1 |
| 3 | Так ферментийг идэвхжүүлэх | 93 | 10 с | 43 |
| Annealing өргөтгөл болон флюресценцийн олж авах | 55 | 30 с | ||
Тохируулсны дараа файлаа хадгалж, хариу үйлдэл хийх програмыг ажиллуулна уу.
4.Results analysis
Хөтөлбөр дууссаны дараа үр дүн нь автоматаар хадгалагдаж, олшруулалтын муруйд дүн шинжилгээ хийнэ. Олшруулалтын муруйг багажийн өгөгдмөл босгонд тохируулсан.
【Explanation of test results 】
1. Туршилтын хүчинтэй байдлыг тодорхойлох: Эерэг хяналтын FAM, VIC суваг нь ердийн олшруулалтын муруйтай байх ба Ct утга нь ерөнхийдөө 34-өөс бага боловч өөр өөр багажуудын босго тохируулгын өөр өөр байдлаас шалтгаалан хэлбэлзэж болно. Сөрөг хяналтын FAM, VIC суваг нь олшруулагдаагүй Ct байх ёстой. Дээрх шаардлагыг нэгэн зэрэг хангасан байх ёстой, эс тэгвээс энэ шалгалт хүчингүй болно гэдгийг хүлээн зөвшөөрч байна.
2. Үр дүнгийн дүгнэлт
| FAM/VIC суваг | Шүүлтийн үр дүн |
| Ct＜37 | Сорьцын шинжилгээ эерэг байна |
| 37≤Ct＜40 | Олшруулалтын муруй нь S хэлбэртэй, сэжигтэй дээжийг дахин шалгах шаардлагатай; дахин шалгалтын дүн тохирч байвал эерэг, эс бөгөөс сөрөг гэж дүгнэнэ |
| Ct≥40 Эсвэл олшруулахгүй | Дээжийн туршилт сөрөг байна (эсвэл иж бүрдлийг илрүүлэх доод хязгаараас доогуур) |
Тайлбар: ( 1) Хэрэв FAM суваг болон VIC суваг хоёулаа нэгэн зэрэг эерэг байвал SARS-Cov-2 эерэг байна.
(2) Хэрэв FAM суваг эсвэл VIC суваг эерэг, нөгөө суваг сөрөг байвал туршилтыг давтан хийнэ. Хэрэв энэ нь нэгэн зэрэг эерэг байвал SARS-Cov-2 эерэг гэж дүгнэнэ, эс бөгөөс SARS-Cov-2 сөрөг гэж дүгнэнэ.
Холбогдох бүтээгдэхүүн
-
COVID-19 IgM/IgG эсрэгбие илрүүлэх хэрэгсэл
COVID-19 IgM/IgG эсрэгбие илрүүлэх иж бүрдэл (Коллоид алтны иммунохроматографийн арга) Бүтээгдэхүүний гарын авлага 【БҮТЭЭГДЭХҮҮНИЙ НЭР】COVID-19 IgM/IgG эсрэгбие илрүүлэх иж бүрдэл （Коллоид алтны иммунохроматографийн арга) 【PACIFKAGs/1KS тест энэ 【 Хураангуй】 Шинэ төрлийн коронавирусууд нь β төрөлд багтдаг. COVID-19 нь амьсгалын замын цочмог халдварт өвчин юм. Хүмүүс ерөнхийдөө мэдрэмтгий байдаг. Одоогийн байдлаар шинэ төрлийн коронавирусын халдвар авсан өвчтөнүүд гол эх үүсвэр болж байна...
-
Нуклейн хүчлийн олборлолт эсвэл цэвэршүүлэх хэрэгсэл
Нуклейн хүчлийг ялгах эсвэл цэвэршүүлэх хэрэгсэл эсвэл -20 хэмд хадгална. Дээжийг 0℃ буржгар ашиглан тээвэрлэнэ. Танилцуулга Нуклейн хүчлийг ялгах буюу цэвэршүүлэх хэрэгсэл (Соронзон бөмбөлгүүдийн арга) нь нуклейн хүчил ялгах автомат багаж ашиглан биеийн шингэнээс (арчдас, плазм, ийлдэс гэх мэт) РНХ ба ДНХ-ийг автоматаар цэвэрлэх зориулалттай. Соронзон бөөмсийн технологи нь...
-
SARS-CoV-2 эсрэгтөрөгчийн шинжилгээний иж бүрдэл (иммунохроматогр...
SARS-CoV-2-ийн эсрэгтөрөгчийн шинжилгээний иж бүрдэл (Иммунохроматографийн арга) Бүтээгдэхүүний гарын авлага 【БҮТЭЭГДЭХҮҮНИЙ НЭР】SARS-CoV-2 антигенийн шинжилгээний иж бүрдэл (Иммунохроматографийн арга) 【Баглаа боодлын үзүүлэлт】 1 сорил/иж бүрдэл короновирусын 【БҮТЭЭГДЭХҮҮН 【БҮТЭЭГДЭХҮҮН 【БҮТЭЭГДЭХҮҮН 【БҮТЭЭГДЭХҮҮН 【БҮТЭЭГДЭХҮҮН 【БҮТЭЭГДЭХҮҮНИЙГ АНТИГӨНИЙГ ТӨЛӨХ иж бүрдэл. COVID-19 нь амьсгалын замын цочмог халдварт өвчин юм. Хүмүүс ерөнхийдөө мэдрэмтгий байдаг. Одоогоор шинэ төрлийн коронавирусын халдвар авсан өвчтөнүүд гол...
-
SARS-CoV-2 эсрэгтөрөгчийн шинжилгээний иж бүрдэл
SARS-CoV-2 эсрэгтөрөгчийн шинжилгээний иж бүрдэл (Иммунохроматографийн арга) Бүтээгдэхүүний гарын авлага 【БҮТЭЭГДЭХҮҮНИЙ НЭР】SARS-CoV-2 антигенийн шинжилгээний иж бүрдэл （Иммунохроматографийн арга) 【САГ БАГЛААНЫ ТОДОРХОЙЛОЛТ】 1 сорил/иж бүрдэл,25TRABITSKest, 】 The Шинэ төрлийн коронавирусууд нь β төрөлд багтдаг. COVID-19 нь амьсгалын замын цочмог халдварт өвчин юм. Хүмүүс ерөнхийдөө мэдрэмтгий байдаг. Одоогийн байдлаар шинэ төрлийн коронавирусын халдвар авсан өвчтөнүүд халдварын гол эх үүсвэр болж байна; шинж тэмдэггүй халдвар авсан хүмүүс...